实验报告二

活孢蛋白激活休眠期真菌及其杀灭的实验研究
北京中研联合医药研究院 陈霖珍 汪庆国

摘要：探讨爱甲组合对休眠真菌孢子激活萌发及杀灭影响
方法：以活体休眠孢子为实验对象，随机将活体休眠孢子分为药物杀菌组及爱甲活孢蛋白激活休眠孢子萌发组；以培养基培养法检测真菌休眠孢子被爱甲灭菌剂—萘醌元杀灭的程度。
结果：药物杀菌组杀灭真菌后，经培养基培养仍有活的菌丝，活孢蛋白激活休眠孢子组杀灭真菌后，经培养基培养几乎看不到活的菌丝。
结论:活孢蛋白休眠孢子激活使其复苏并被萘醌元一同杀灭。
实验证实活孢蛋白能解除真菌孢子休眠期，加快孢子萌发成长为菌丝。休眠期孢子对抗真菌药物不敏感，解除真菌孢子休眠期是当前治疗灰指甲复发的关键。到目前为止，治疗灰指甲的众多制剂中，尚无一种药物进行这方面的研究；活孢蛋白是根据真菌繁殖特性及环境，在抗真菌成年菌丝的同时加入WPH，WPH能改变这种特性，缩短孢子休眠期，同时加快孢子萌发。
活孢蛋白具有缩短孢子休眠期和加快孢子萌发的功效，而萘醌元在彻底杀菌预防复发方面有很好的效果。因此，本文选择爱甲组合进行研究，观察其对静止休眠真菌体杀灭作用。

材料与方法

实验仪器和试剂 细菌培养箱 培养皿 消毒锅 移液管 BH-2型YMPAS显微镜 培养基等。
实验真菌模型：生长旺盛的活体真菌菌体。
实验分组
将活体真菌体分为两组，每组8只培养基；药物抗菌组：每日在装有活性真菌体的培养基内加入浓度为0.01ug/ml的特比萘酚和伊曲康唑混合溶液1ml，连续7日，镜检;爱甲组合制剂组：每日在装有活性真菌体的培养基内加入1ml爱甲制剂，连续7日，镜检。

结果

真菌药物抗菌组：未检测到活的成年菌丝，但可观测到大批处于静止休眠的真菌孢子；爱甲制剂组：未检测到成年菌丝和休眠真菌孢子。

结论：

抗真菌药物组：真菌成年菌丝对抗真菌药物敏感，真菌孢子遇到不适宜环境—抗菌药物，会延迟萌发，处于静止休眠状态，对药物极不敏感；一旦用药结束，真菌孢子便会萌发、生长成具有繁殖能力的真菌菌丝体。爱甲制剂组：爱甲制剂特含活孢蛋白，刺激真菌孢子成长成成年菌丝，被爱甲杀菌成分萘醌元将其一同杀灭。